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      血清樣本處理過程

      日期:2022-06-20 06:40
      瀏覽次數:3
      摘要: 血清樣本處理: 1、血清細胞培養上清 血清細胞培養上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。 2、血清細胞裂解液 1)吸去培養板內的培養基,用消化血清細胞,加適量培養基將細胞從培養板上吹下來。懸浮細胞可省略。 2)收集血清細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養基,用預冷的PBS潤洗3次。 3)加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶...

      血清樣本處理:


        1、血清細胞培養上清


      血清細胞培養上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。


         2、血清細胞裂解液


         1)吸去培養板內的培養基,用消化血清細胞,加適量培養基將細胞從培養板上吹下來。懸浮細胞可省略。


         2)收集血清細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養基,用預冷的PBS潤洗3次。


         3)加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。


         4)將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復凍融幾次,使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎,以達到裂解的目的。


         3、血清


        血清血清是zui常用于elISA試劑盒檢測的一類樣本,處理也比較簡單。

      用無熱原、無內毒su的試管或離心管采集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。

      采血過程中應避免溶血,因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質,在以HRP為標記的ELISA試劑盒檢測中會有非特異性的顯色,而導致檢測的不準確性。同時也應避免xi菌污染,因為菌體內可能含有內源性的HRP從而導致檢測的假陽性。


         4、血漿


         用含血清的或離心管采集血液標本,標本采集后30min內4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

      常用的抗凝劑為EDTA、和等,檢測時還應仔細閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。

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